Tip:
Highlight text to annotate it
X
Velkommen til Novus Visual protokollen Series.
I denne video vil du lære, hvordan du udfører alle faser af fluorescerende
immuncytokemi ved anvendelse af de mest almindelige metoder til dette assay.
Før start af ICC procedure,
Vi vil vise, hvordan man forbereder dækglas og celledyrkningsmedier plader
efterfulgt af udpladning af vores celler.
Vi begynder med syre behandle nye dækglas i en molær af saltsyre for
24 timer.
Efter forsigtig dekantering af syren og fjerne dækglas,
Vi vask hver med destilleret vand,
derefter en afsluttende skylning med ethanol.
Som et valgfrit trin kan du placere dækglassene i en subbing rack oversvømme
i en 0,1 mg / ml opløsning gelatine eller polylysin
i fem minutter.
Disse belægninger aide i tilvejebringe yderligere vedhæftning af celler til
dækglas sikre, at de ikke løs under efterfølgende vasketrin.
Efter behandling fjerne subbing rack og tørre dækglassene i kulturen
hætte eller en opvarmet ovn.
Rene, tørre dækglas indsættes derefter i hver brønd i en seks brønde kultur
tallerken
og dækket med et låg.
For at spare tid, kan store mængder af plader fremstilles i god tid til senere brug.
Pladerne kan også steriliseres ved at anbringe dem under hætten er UV-lys.
Med rene dækglas fremstillet i seks brøndplader, kan vi nu tilføje vores celler.
Platted her i celler tilføjer en densitet på en halv million celler pr.
Celler dyrkes derefter natten over i inkubatoren eller indtil de når dit foretrukne
densitet.